環(huán)凱培養(yǎng)基檢驗原理:胰酪胨、大豆木瓜蛋白酶水解物提供氮源、維生素和生長因子;氯化鈉維持均衡的滲透壓;瓊脂是凝固劑。
環(huán)凱培養(yǎng)基是供微生物、植物組織和動物組織生長和維持用的人工配制的養(yǎng)料,一般都含有碳水化合物、含氮物質(zhì)、無機鹽(包括微量元素)以及維生素和水等。
環(huán)凱培養(yǎng)基使用方法:
1、稱取水解酪蛋白胨(MH)瓊脂38g,加入蒸餾水或去離子水1 L,攪拌加熱煮沸至*溶解,分裝三角瓶,121℃高壓滅菌15min,備用。
2、試驗菌液的制備:從TSA平皿上挑取3—5個形態(tài)相似的菌落頂端部分接種MHB或TSB培養(yǎng)基。經(jīng)36±1℃培養(yǎng)4—6小時后,比濁至0.5麥氏單位。
3、接種:用無菌棉拭浸取比濁好的菌液,在管壁內(nèi)輕輕轉(zhuǎn)壓除去過多菌液,然后再輕輕涂抹培養(yǎng)基,每一平皿涂抹三次。每次涂抹后均需將平皿轉(zhuǎn)動60度,再行下一次涂抹。每一質(zhì)控菌株涂抹三個平皿。
4、貼片:接種后的平皿置室溫片刻,待稍干后,用無菌鑷子將抗生素紙片均勻貼布于平皿瓊脂表面。各紙片間中心間距不得小于24mm,紙片距平皿邊不得小于15mm。一旦紙片接觸瓊脂表面,即不可再移動,因此時藥物已開始擴散。
5、培養(yǎng):紙片貼妥后,在15—30分鐘內(nèi),將平皿翻過來置于36±1℃培養(yǎng)16—24h后,觀察結(jié)果。平皿培養(yǎng)時不宜堆放,以二個相疊為宜。
環(huán)凱培養(yǎng)基特點:
1.采用國內(nèi)的培養(yǎng)基原料;核心成分采用進口原料。
2.干粉細膩均勻、易溶解、配置后澄清透明。
3.凝固點低、利于傾注平板及減少對微生物的熱損傷。
4.瓶身瓶蓋特別避光設(shè)計。改良后的內(nèi)墊圈緊緊吸附于瓶蓋上不易脫落,防潮性能尤佳。
5.中英文雙語標識。
環(huán)凱培養(yǎng)基的滅菌方式簡述
1.首先將環(huán)凱培養(yǎng)基內(nèi)層滅菌筒取出,再向外層鍋加入適量的水,使水面與三角擱架相平為宜。
2.放回滅菌桶,并裝入待滅菌物品。三角瓶與試管口端均不要與桶壁接觸,以免冷凝水淋濕包口的紙而透入棉塞,
3.加蓋,將蓋上的排氣軟管插入內(nèi)層滅菌桶的排氣槽內(nèi)。再以兩兩對稱的方式同時旋緊相對的兩個螺栓。
4.通電加熱,并同時打開排氣閥,使水沸騰以排除鍋內(nèi)的冷空氣。待冷空氣*排盡后,關(guān)上排氣閥,讓鍋內(nèi)的溫度隨蒸汽壓力增加而逐漸上升,當鍋內(nèi)壓力升到所需壓力時,控制熱源,維持壓力至所需時間。
5.滅菌所需時間到后,切斷電源,讓滅菌鍋內(nèi)溫度自然下降,當壓力表的壓力降至0時,打開排氣閥,旋松螺栓,打開蓋子,取出滅菌物品。如果壓力未降到0時,打開排氣閥,就會因鍋內(nèi)壓力突然下降,使容器內(nèi)的
環(huán)凱培養(yǎng)基由于內(nèi)外壓力不平衡而沖出燒瓶或試管口,造成棉塞沾染培養(yǎng)基而發(fā)生污染。